梭菌疾病是一種古老的疾病,多年來主要發生在羊群中,是羊非常重要的一種疾病。牛梭菌病和羊梭菌病的病原特性非常相似。近幾年隨著養殖規模增大、密度增加、疫苗注射等各種外界誘因,造成牛梭菌疾病在牧場頻繁發生,才引起牧場高度重視。
梭菌性疾病是由多種厭氧性芽孢梭菌經過多種途徑感染引起多種動物和人發病的一類急性(發病特別急)、中毒性(由毒素引起)、散發性(在牧場中不會造成接觸性感染)、致死性(一旦發生100%死亡)、非接觸性傳染病的總稱。通常稱羊梭菌疾病或牛梭菌疾病。
一、牛梭菌病分類
根據感染途徑、臨床表現不同,牛的梭菌疾病可分為以下三類:
1.經傷口感染引起的牛局部氣性水腫、喘氣
(1)腐敗梭菌引起的惡性水腫,是產后牛最容易發生的一種急性死亡性疾病。
(2)氣腫疽梭菌引起的氣性壞疽,主要發生在成年牛、青年牛的腿部、臀部,又叫黑白病,觸診有摩擦音。
(3)A型諾維氏梭菌引起的水腫。
(4)A型產氣莢膜梭菌引起的氣性壞疽,在成年牛中不多見,主要發生在犢牛。
(5)溶組織梭菌引起的氣性壞疽。
2.經消化道感染引起犢牛腸毒血癥及紅尿病
(1)A、B、C、D、E型產氣莢膜梭菌引起1月齡到周歲的犢牛腸毒血癥。其中,最容易發生的是A型、C型和D型。
(2)D型諾維氏菌主要引起出生7天內的犢牛血紅素尿(紅尿?。摬≡谝幠;霎敯l生比例不高。
3.經毒素污染的食物引起人和動物的食物中毒
(1)主要由A型產氣莢膜梭菌引起。
(2)肉毒梭菌。
二、牛梭菌病共同特點
1.發病機理相同。均由外毒素致病,通過傷口或消化道感染細菌繁殖后產生毒素,經過血液循環進入全身、大腦、心血,引起一系列中毒癥狀。
2.免疫機理相同。以體液免疫為主,一旦發病,病牛早期可以用高免血清/抗毒素血清進行治療。
3.潛伏期、病程均較短。一般情況下發病快的6~12小時死亡,大部分不超過36小時死亡。發病快,死亡也較快。
4.死前均沒有特殊癥狀。可能早晨正常、晚上死亡,或晚上正常、早晨死在圈中,看不到任何癥狀。但死亡后會出現神經癥狀,如眼球突出、耳朵向后、四肢僵直、角弓反張等。
5.均有發病誘因。在了解和診斷梭菌病的主要誘因時,需要了解發病歷史,如近期是否打過疫苗、是否做過手術、是否有其他外傷感染、死亡犢牛是否采食過量造成消化不良而引起等。
6.散發、非接觸性傳播。每過一段時間死一頭牛,散發性是特點。
7.毒素檢測是最主要也是最準確的確診依據。
三、牛梭菌病的危害及發病現狀
近幾年,各個牧場都非常重視牛的梭菌病,雖然其發病率不高,但致死率很高,一年累計下來損失很大。
1.牛梭菌病分布廣,幾乎所有的牧場都可能發生,因為牛的腸道、牛舍環境、糞便、土壤中都可能帶細菌芽孢,所以梭菌病又稱為土源性傳染病。特別是在陰雨連綿以及出現洪澇災害時,芽孢一旦被沖出來污染飼草料后很容易爆發梭菌病。
2.散發,但致死率很高。
3.疫苗是目前唯一有效的預防手段。
4.多種病原體可導致人感染發病,危害人體健康與食品安全,如A型魏氏梭菌可引起人傷口感染也可造成牛奶食品污染。在牧場一定要佩戴手套,手指頭出現傷口后一定要消毒,防止A型魏氏梭菌引起氣性壞疽。
四、牛梭菌病防控存在的問題
1.是否使用疫苗,舉棋不定。目前基本上不管大小型牧場都在使用梭菌疫苗。
2.發病誘因比較多,難以管控。這是一個普遍存在的問題。
3.牧場現場診斷存在不確定性。如急性死亡的不一定是由梭菌引起,需要根據其他癥狀共同進行鑒別。梭菌病主要是在現場根據流行病學、死亡時間、剖解變化等初步診斷。如果送檢,結論存在一定的不確定性,因為送檢的病料、檢測方法、檢測目標等都會存在差異。
4.對于動物的梭菌病尚沒有行業認可的快速檢測方法。目前能使用的方法只有兩種:第一種是快速鏡檢,盡快采集死亡牛的脾臟、肝臟或水腫液體、組織,檢測是否有腐敗梭菌,其他梭菌無效;第二種是PCR方法,檢測組織液中的毒素進行診斷。
5.疫苗效果評價體系還有待建立。我國目前沒有疫苗抗體檢測方法,注射完梭菌疫苗后2~3周抗體水平達到30%為合格。希望盡快建立疫苗效果評價體系,為疫苗免疫提供技術支撐。
6.新型疫苗研發比較滯后?,F在使用的疫苗是全菌體疫苗,未來的疫苗一定是類毒素、毒素、毒素亞單位疫苗。每一種梭菌疾病的主要毒素已經確定,克隆毒素后通過原核或真核表達,產生的亞肝疫苗、毒素亞肝疫苗更有針對性、更安全、效果更好。
五、犢牛產氣莢膜梭菌(魏氏梭菌)毒血癥
1.病原特性
(1)形態特征:G+帶莢膜單在、兩端鈍圓大桿菌。
(2)培養特征:專性厭氧,在羊鮮血平板上菌落呈“雙溶血環”。
(3)存在部位:牛腸道、糞便、環境、土壤中,主要是芽孢。死亡后偶見肝、脾中存在。
(4)致病性:A、B、C、D、E型產氣莢膜梭菌均可致病,可分泌α、β、ε、ι毒素,其中A型含有α毒素,B型含有α、β、ε毒素,C型含有α、β毒素,D型含有α、ε毒素,E型含有ι毒素。ε毒素在胰蛋白酶作用下被激活,引起腸毒血癥,也就是說大部分犢牛死亡,出現碳水化物采食較多的,一般都是由ε毒素所引起。
(5)抵抗力:細菌芽孢可耐受高溫(90℃)和干燥,但對多種化學消毒劑敏感。氯制劑有效。
2.流行特點
(1)流行方式:散發、地方性、爆發。
(2)感染途徑:消化道感染。
(3)多發日齡與體況:1~16周齡犢牛均可發生。1~2月齡和斷奶后兩個階段高發。生長較快、攝乳量和采食量較多的肥壯犢牛如果出現急性死亡,首先懷疑梭菌。
(4)誘發因素:碳水化合物、蛋白質飼料攝入過多(飽食)引起的消化不良;大腸桿菌、冠狀病毒感染;菌群失調。
3.診斷要點
(1)臨床與病史調查:發病牛的日齡、體況、死前癥狀(血便)、病程、免疫狀況。
(2)尸體剖檢:剖解前觀察到角弓反張,剖解后發現小腸(空腸段)漿膜和黏膜出血、壞死,腸液呈茶色帶血;腸系膜淋巴結顯著腫大、出血;腎水腫變形,切開后液體流出,心外膜出血,腦脊液增多。剖解疑似梭菌病的犢牛,除了觀察死亡后的臨床尸體表現外,重點觀察腸道和腎臟。
(3)實驗室診斷:①毒素測定:小腸內容物送檢(20mL,12小時內),檢測毒素。方法:小鼠或家兔靜脈注射,毒素中和試驗。②肝臟組織或脾臟組織進行PCR、熒光抗體檢測。③腸內容物PCR檢測毒素,這是最可靠的一種方法。
(4)鑒別診斷:1~16周齡犢牛一旦出現死亡,均與梭菌病有關。如李氏桿菌性腦炎,大腸桿菌性腦炎,腸球菌性腦炎,IBR-腦炎型;冠狀病毒腹瀉、沙門氏菌性腸炎、BVD-血便。
4.防疫要點
(1)疫苗接種:牛梭菌多聯滅活菌苗(六聯九防)。干奶期注射一次,防止出現難產;產前1個月加強一次。犢牛3~4月齡注射一次,防止發病。
(2)發病治療:可以使用抗血清,但價格較高,而且量不多。
六、孕牛惡性水腫
1.病原特性:腐敗梭菌
(1)形態特征:G+無莢膜芽孢梭菌。死亡牛肝或羊肝表面觸片染色鏡檢呈長絲狀;肉湯培養物呈單在芽孢居中橢圓形桿菌。
(2)培養特征:一般不做培養,顯示器快速診斷即可。如果培養,在LB血平板上呈“紐扣狀”,邊緣呈放射狀菌落。
(3)存在部位:腸道、環境、土壤,病死牛肝、脾、腹水中。病死牛的肝臟、脾臟中可以檢測到細菌,但必須是夏天死亡6小時內、冬天死亡12小時內檢測。
(4)致病性:可分泌α、β、γ、δ這4種外毒素,其中α毒素為耐氧的溶血素,是主要毒素,可致宿主細胞壞死、溶解。
2.流行特點
(1)易感牛:懷孕牛、成母牛。
(2)傳染途徑:主要通過傷口感染,如助產、免疫注射、治療、手術、胃腸道損傷。
(3)發病誘因:難產助產時消毒不嚴,助產后未及時使用抗生素;分娩時地面環境衛生不良導致傷口感染。
3.診斷要點
(1)病史及尸體變化:創傷史。突然死亡,死前無任何癥狀(區分牛出敗,牛在死前一定有癥狀,而且一定會出現體溫升高、呼吸加快)。死后局部炎性水腫,特別是產道、肛門周圍、臀部、大腿有水腫或氣腫,切開后流出污紅色滲出液,尸體易腐敗,但無迅速軟化及天然孔出血(區別炭疽)。
(2)實驗室診斷:肝表面觸片瑞特氏染色鏡檢最準確,染色后發現晶體即可確診。另外,抽取局部水腫液和肝組織進行PCR檢測,檢出毒素種類。肝組織分離培養(12小時內冷藏送檢)一般不做。毒素致病力測定,病料和培養物小鼠腹腔注射。肝組織熒光抗體檢測。(3)鑒別診斷
炭疽:尸體變化(尸僵不全、天然孔出血、血凝不良),耳組織涂片鏡檢,帶莢膜、竹節狀兩端平直的大桿菌。牧場很少發生,但發生洪澇災害或周邊牧場發生某些炭疽病例時,需要重點關注,一般比較容易分辨。
牛出?。哼\輸應激、氣候變化或其他誘因,死前體溫升高41℃以上,極度呼吸困難,持續至少24~36小時。鼻腔流出帶泡沫鮮血,主要由肺臟出血引起。心血涂片可見兩級濃染巴氏桿菌。
氣腫疽:肌肉豐滿的局部如腿部、大腿部出現氣性海棉狀腫脹。PCR檢測,注射器吸0.5~1毫升生理鹽水注射進去再抽出來,可以測定局部是否含毒素。
急性酸中毒、低鈣血癥、急性酮病:圍產期孕牛及新產牛多發。使用碳酸氫鈉、葡萄糖酸鈣、葡萄糖靜脈注射有效。
4.防疫要點
(1)免疫接種:同前。所有梭菌疫苗接種都一樣。
(2)避免外傷:助產時衛生消毒,術后及時使用抗生素,免疫注射時一定要做好針頭衛生。建議一個針頭注射一針。
(3)環境控制:牛舍、產房的衛生與消毒。(4)早期治療:可以采用大劑量青霉素靜脈肌注,但效果甚微。
5.人的感染
根據國外文獻報道,腐敗梭菌可引起人的胰腺炎、壞死性腸炎、結腸癌等。牧場應做好牛舍糞污清除及無害化處理,關注公共衛生安全。
七、青年牛氣腫疽及惡性水腫
1.病原特性
主要是氣腫疽梭菌、A型諾維氏菌、A型魏氏梭菌,都會引起青年牛局部氣腫和壞疽。
(1)形態特征:均為革蘭氏陽性厭氧芽孢桿菌,無莢膜(A型魏氏梭菌有莢膜)。
(2)存在部位:環境、土壤、糞便、腸道中。死后存在于肝、脾中。
(3)致病性:可產生α、β、γ、δ、ε等不同的8種毒素。氣腫疽含前4種,A型魏氏梭菌含α毒素,對小鼠、豚鼠、家兔均有致病力,其中氣腫疽梭菌對小鼠致病力弱,對家兔不致病。
2.流行特點
(1)通過傷口感染。(2)多發于青年牛,以2歲下多發。氣腫疽多發于肉牛和放牧牛。
3.診斷要點
(1)了解皮膚外傷史,確認有無傷口。
(2)臨床特征:氣腫疽病程比惡性水腫稍長,持續2~3天。病牛死前表現體溫升高到41℃以上,出現瘸腿跛行、渾身發抖,有時全身劇烈抽搐。局部肌肉(大腿、臂部、頸部、胸部、腹下)出現氣性腫脹(捻發音),組織壞死呈紫色(黑腿病、氣性壞疽)。
(3)病理變化:切開腫脹部位后,流出黃色帶氣泡的膠樣液體,切面呈海綿狀。
(4)確診需要進行病變組織、肝、脾臟PCR檢測或熒光抗體檢測。
(5)病料分離培養、病料和培養物動物接種(小鼠、豚鼠、家兔同時注射)一般不做。
4.防疫要點
(1)免疫接種牛梭菌多聯滅活苗。
(2)防止牛只出現外傷。
八、總結
牛梭菌性疾病在牛場中雖然不構成流行,但因致死率較高而給牧場帶來一定的危害。是否接種疫苗需要根據牧場該病的歷年發生情況來定。發病率累計較高的情況下,疫苗接種是當前唯一有效的防控措施。
牧場是否存在梭菌性疾病的風險,應以臨床病例診斷和實驗室確診病例數來評估疾病的存在。
作為科研單位和高校,建立快速準確的診斷方法、疫苗效果評價體系是今后科研的主攻方向。而研發新型的疫苗是今后疫苗廠家的主攻方向。
(本文根據天康制藥主辦的“冬季牛呼吸道及梭菌病防控專場”專家講課內容整理)