摘要:本文從禽流感類型、致病性、發病特點、病原學、診斷技術以及疫苗研制等方面著手,闡述了我國在禽流感研究方面取得的進展以及相應成就。
1 禽流感的發病特點
通常禽流感會與大腸桿菌病、傳染性氣管炎和支氣管炎等形成混合感染,死亡率與發病率的高低受禽群性別、生長環境以及自身毒株等因素影響較大。例如,禽流感病毒進入到黏膜時,將促進大腸桿菌繼發感染,從而導致禽流感病毒血凝作用進一步增強,進而造成禽群發病率與死亡率都相對較高。禽流感病毒的血清類型較多,不同類型之間的交叉保護功能較弱,同一類型血清中的不同毒株之間也存在較大差異。
2 禽流感病原學研究
對于禽流感病毒致病性與傳播機制的研究,中國農業大學以及哈爾濱獸醫研究所等單位運用反向遺傳和定點突變等相關操作技術,證實H5N1亞型禽流感病毒PB2蛋白D701N、NS1蛋白P42S等都與病毒對哺乳動物的致病力增強有較大關系。另外,以結構生物技術為基礎,通過蛋白質水平來認知禽流感病毒方面的研究,中國科學院走在了世界前列。例如對H7N9病毒HA蛋白的晶體結構解析,對該病毒感染人類的原因進行了具體解釋,以及對H5N1流感病毒聚合酶蛋白復合體晶體結構的解析,為順利研發抗流感藥物打下了良好的基礎。
3 禽流感病毒的分類及致病性
(1)禽流感病毒的分類。根據病毒粒子表面的NA與HA,可以將禽流感病毒分成9個N亞型與15個H亞型。其中H5與H7這兩個類型的禽流感病毒很容易轉變為高致病性禽流感,如果沒有在早期對其進行有效控制,將會在禽群中迅速傳播和繁殖,所以受到養殖人員和科研人員的重點關注。
(2)禽流感的致病性。從致病性程度方面來看,禽流感病毒可以分成非致病性、低致病性以及高致病性3種類型。而H5與H7亞毒株能夠引發高致病性禽流感,這種禽流感病毒傳播的速度非常快,潛伏期也比較短,同時發病也非常急,并且發病率與死亡率十分高,不過傳播范圍有限制。而低致病性禽流感則相反。當禽群感染低致病性禽流感后,若不及時采取合理措施,將難以根除,并且疫情會不斷擴散,病毒毒力還將進一步增強。
4 實驗室診斷技術
對于禽流感的診斷方面,在分析染病禽只的臨床癥狀、病理變化以及流行病學后,通過AI抗體能夠進行初步診斷,然后進行實驗室病毒分離以及免疫學方法檢測到病毒就能夠確診。免疫檢測法是根據已知的抗原檢測未知抗體,或根據已知抗體檢測未知抗原。其包括酶聯免疫吸附試驗、血凝抑制試驗與血凝試驗、膠體金法以及瓊脂凝膠免疫擴散試驗等。禽流感分子生物學診斷方法包含核酸探針、基因探針以及PCR技術等診斷技術。
我國相關研究人員一直致力于對傳統診斷技術的研究和改進,以促進診斷的特異性和靈敏度的提高。哈爾濱獸醫研究所研制出了H1-H15以及N1-N9的標準診斷和分型抗原和血清,并據此制定了相應的HI檢測方法。隨著分子技術的發展,我國現已制定了H5、H7、H9亞型禽流感病毒熒光RT-PCR診斷方法。此外,我國禽流感相關研究人員還通過DNA芯片技術,設計出了能夠一次性快速鑒別出近20中不同HA亞型以及近10種不同NA亞型禽流感病毒。
5 疫苗的應用
基因工程技術的不斷應用和新型佐劑的涌現,更加速了疫苗研發的腳步。不斷研究更為安全有效的禽流感疫苗,克服傳統疫苗的缺陷,更好地防控禽流感,成為科研人員關注的焦點。進入二十一世紀以來,生物技術取得了突飛猛進的發展,其中基因工程技術的深入研究和應用,促使疫苗相關技術不斷取得突破。
我國研究人員將鴨腸炎病毒為載體插入H5亞型HA基因,制成H5亞型病毒活載體疫苗,可在保護鴨群免受H5N1亞型禽流感以及鴨腸炎病毒感染方面具有良好的效果。哈爾濱獸醫研究所分別以雞痘病毒與新城疫病毒為載體插入H5亞型HA基因,制成H5亞型禽流感減毒活載體疫苗,經由農業部批準投入實際應用中。2013年中國科學家26日在杭州宣布,成功研發出人感染H7N9禽流感病毒疫苗株,這也是中國自主研發的首例流感病毒疫苗株?,F階段,我國能夠研制與應用的疫苗主要有滅活全病毒苗、DNA疫苗、亞單位疫苗、重組活載體疫苗和通用疫苗、反向遺傳重組疫苗、轉基因植物疫苗等。
(李偉 王松 李寧 遼寧省北鎮市畜牧獸醫檢疫中心)