摘要：近幾十年來，各個養(yǎng)殖場引進(jìn)了大量外國品種與我國優(yōu)良地方品種進(jìn)行廣泛雜交，導(dǎo)致地方品種優(yōu)良基因的流失。為了更好保存我國畜禽的優(yōu)良基因，在生產(chǎn)中采取了活體保種、超低溫保種等方法。筆者就應(yīng)用比較多的幾種方法進(jìn)行了介紹。

    中國是個畜禽品種比較豐富的國家之一。但近些年來，許多養(yǎng)殖者為了追逐經(jīng)濟(jì)效益，大量引進(jìn)外來品種與當(dāng)?shù)氐膬?yōu)良家畜品種雜交，使一些品種瀕臨滅絕。冀南黃牛、草原紅牛、甘肅著名的八眉豬和甘肅黑豬等很多優(yōu)良地方品種已經(jīng)到了滅絕邊緣。為了保護(hù)國家的優(yōu)良家畜品種，保種工作是目前一件緊迫而重要的任務(wù)。

    1 活體保種

    可以從優(yōu)良品種群體中挑選優(yōu)秀的公、母畜，在其原產(chǎn)地的保種場或者保護(hù)區(qū)進(jìn)行活體保存。由于我國生物技術(shù)起步較晚，活體保存仍是目前畜禽保種最常用的方法。家畜活畜保種的效果受留種數(shù)量、公母畜比例、選配方法和世代間隔等影響。通江縣空山黃牛的保種方案是：黃牛保種核心群要求公牛為特級或一級，80％的母牛為一級以上。留種方式：種母牛100頭～200頭，種公牛20頭以上，三代之內(nèi)沒有血緣關(guān)系的家系不少于6個。采用各家系等量留種，即每頭公牛后代留l頭公牛，每頭母牛后代留l頭母牛。交配方式為避免近交，世代間隔定為6年。吳平山對江西幾個地方品種豬的進(jìn)行了活體保種，其保種群由60頭～100頭純種母豬和6頭～10頭純種公豬組成。這樣小的群體豬近交系數(shù)上升快，加上遺傳漂變必定會造成基因的丟失，很容易因近交而引起退化。這時，可以通過同一品種內(nèi)的不同品系雜交或輪回雜交，來增加小群體內(nèi)的遺傳多樣性，或者母豬適當(dāng)引入外血。

    2 超低溫保種

    超低溫包括冷凍配子、胚胎、體細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞等。

    2.1 冷凍精子

    1950年，英國的Polge和Smith等用冷凍牛精液，使用人工授精技術(shù)產(chǎn)下了世界上第1頭用凍精受孕的小牛，是養(yǎng)牛業(yè)的一個飛躍。如今，為保護(hù)瀕危動物和優(yōu)良地方品種，世界各地相繼建立了多種動物精液基因庫。20世紀(jì)80年代，我國采用冷凍精液授精的奶牛已占90％以上。朱志偉等制作湖羊的凍精和冷凍胚胎，解凍后凍后平均活力為0.35～0.40。雖然綿羊凍精制作保存技術(shù)已經(jīng)比較成熟，但凍精的受胎率低仍是限制綿羊冷凍精液進(jìn)行生產(chǎn)推廣的重要因素。豬精子對冷應(yīng)激特別敏感，凍精的受胎率比較低，窩產(chǎn)仔數(shù)也較低；因此，豬精液的冷凍技術(shù)應(yīng)用難以推廣。馬月輝、吳常信等認(rèn)為，凍精和冷凍胚胎能最大限度地防止質(zhì)量性狀等位基因的丟失并減少數(shù)量性狀的遺傳漂變。但這種方法不能保存全部基因和性狀，還有必要用凍精對畜禽進(jìn)行回交，并結(jié)合冷凍胚胎技術(shù)，必要時通過胚胎移植的方法來獲得純種。

    2.2 冷凍卵子

    與精子相比，卵細(xì)胞體積較大，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，抗凍能力低，解凍后比精子復(fù)活率低。在其冷凍保存時易發(fā)生細(xì)胞骨架解體、基因異常、透明帶質(zhì)地變硬、膜完整性喪失等損傷，進(jìn)而影響冷凍后卵母細(xì)胞的發(fā)育能力，降低了復(fù)蘇后的受精率。

    2.3 冷凍胚胎

    胚胎冷凍技術(shù)是將胚胎和冷凍液裝入冷凍管中，經(jīng)過慢速降溫（第2天～第3天的胚胎）和快速降溫（第5天～第6天的囊胚）后，使胚胎停止發(fā)育，并在液氮中保存的一種技術(shù)。凍胚保種延長了雙親的配種年齡和世代間隔，此技術(shù)促進(jìn)了胚胎移植在畜牧業(yè)中的推廣，也給品種資源保護(hù)提供了可靠經(jīng)濟(jì)的途徑。王榮民等研究發(fā)現(xiàn)，年齡在3歲左右的經(jīng)產(chǎn)母牛冷凍胚胎采集制作效果更好。經(jīng)吳細(xì)波研究發(fā)現(xiàn)，馬頭羊以細(xì)管玻璃化冷凍比OPS冷凍效果略好。2006 年，桑國俊等發(fā)明了玻璃化冷凍后保存豬胚胎的方法，胚胎移植后的產(chǎn)仔率最高能達(dá)到17.74％，還遠(yuǎn)不能將冷凍胚胎用于商業(yè)。

    2.4 冷凍體細(xì)胞和胚胎干細(xì)胞

    第一個克隆羊Dolly的出現(xiàn)，證實了哺乳動物體細(xì)胞具有全能性的理論。構(gòu)成生物體的各種細(xì)胞都含有全套的遺傳信息基因，使得每一種細(xì)胞都有可能誘導(dǎo)發(fā)育成為個體的潛能。取腎、皮膚等組織的體細(xì)胞，經(jīng)體外傳代培養(yǎng)，得到成纖維細(xì)胞或上皮狀細(xì)胞。再經(jīng)消化處理后，可以長期保存在液氮中。需要時通過核移植技術(shù)克隆出與供體一樣的個體，從而達(dá)到保護(hù)種質(zhì)資源的目的。中國農(nóng)科院畜牧研究所遺傳資源研究室從成立以來，共建立了民豬、魯西黃牛等50多個瀕危地方品種的成纖維細(xì)胞庫。這些細(xì)胞將為種質(zhì)資源的保護(hù)提供了更好的思路。

    從原腸胚期之前早期胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中取出的胚胎干細(xì)胞，經(jīng)過培養(yǎng)還具有繼續(xù)分裂和增殖的能力和多向分化的特性。其在體外或者體內(nèi)都能被誘導(dǎo)分化成機(jī)體幾乎任何一種的細(xì)胞類型。而且其經(jīng)過解凍后成活率高達(dá)90％。進(jìn)行核移植后，在短期內(nèi)可獲得大量與供體完全相同的個體，對于保護(hù)珍稀野生動物有著重要意義。

    3 繁殖技術(shù)保種

    3.1 胚胎移植

    胚胎移植又稱受精卵移植，俗稱借腹懷胎，是指把通過手術(shù)或非手術(shù)方法取出來的雌性動物的早期胚胎，或者從體外受精胚胎，移植到經(jīng)過同期發(fā)情處理，并且處于同樣生理狀態(tài)的其他同種雌性動物體內(nèi)，然后繼續(xù)發(fā)育為個體的技術(shù)。赤峰市在20世紀(jì)80年代末即開始了牛的胚胎移植技術(shù)的研究和應(yīng)用。由于我國胚胎技術(shù)研究試驗起步較晚，國產(chǎn)超排激素效果不太理想，移植器械的生產(chǎn)廠家很少；因此，此技術(shù)相關(guān)的器械、藥品和激素主要靠進(jìn)口。成本的提高，阻礙了此技術(shù)的推廣。目前，此技術(shù)主要用于種用家畜的生產(chǎn)。

    3.2 胚胎切割

    胚胎分割是指將哺乳動物的早期胚胎采用手術(shù)或非手術(shù)的方法從子宮或輸卵管中取出，用顯微操作儀的玻璃針把每個卵裂球分開，分別放入透明帶，然后移植，最后發(fā)育成同卵雙胎、同卵多胎的克隆動物。因此，胚胎分割技術(shù)可以有效擴(kuò)大優(yōu)質(zhì)種畜的和瀕危野生動物數(shù)量。

    4 結(jié)語

    綜上所述，活體保種是一種最基礎(chǔ)的保種方法；冷凍精子和胚胎的保種技術(shù)也比較成熟，在全國已經(jīng)推廣。在胚胎發(fā)育機(jī)制和基因表達(dá)調(diào)控等未研究清楚的情況下，胚胎切割、克隆、DNA標(biāo)記等保種方法在應(yīng)用和推廣方面受到了限制。未來保種方法的研究方向應(yīng)該是以群體遺傳學(xué)和分子遺傳學(xué)相結(jié)合為主。

    作者簡介：張穎，1980年出生，女，漢族，講師，研究生學(xué)歷，主要從事動物繁殖與改良等課程的教學(xué)與研究工作。

   （張穎  河北省邢臺市現(xiàn)代職業(yè)學(xué)校）