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不同PCR方法對豬偽狂犬病原檢出率的比較

發布時間:2016-10-09 15:10    作者:.    來源:    查看:
    豬偽狂犬病是影響豬群健康的重要疾病,在豬群中的發病率很高。該病可引起妊娠母豬流產、死胎和公豬的繁殖障礙,仔豬神經癥狀及高死亡率。偽狂犬病毒的實驗室診斷有普通PCR、實時熒光PCR及ELISA等。本文就普通PCR和實時熒光PCR在偽狂犬病原檢測中的檢出率做一比較論述。

    1  材料與方法

   (1)偽狂犬疑似病料。豫北某豬場11月初產房的多群2~3日齡仔豬出現腹瀉癥狀,病仔豬皮膚發紅,體溫升高,精神不振,嘔吐,逐漸消瘦,部分病豬有神經癥狀,出現發抖,后肢走路不穩,共濟失調。使用抗生素治療無效,病死率高達100%。采集病豬不同臟器、腦組織和腸內容物等,共10頭份進行檢測。

   (2)主要試劑。偽狂犬病毒PCR檢測試劑盒,購自北京世紀元亨動物防疫技術有限公司;偽狂犬病毒熒光PCR檢測試劑盒,購自廣州維伯鑫生物科技有限公司。

   (3)方法。對病料的處理以及PCR擴增,參照試劑盒說明書進行。

    2  結果

    應用北京世紀元亨動物防疫技術有限公司偽狂犬病毒PCR檢測試劑盒,對采集的病料進行病原學檢測,結果見圖1。

    應用廣州維伯鑫生物科技有限公司偽狂犬病毒熒光PCR檢測試劑盒,對采集病料進行病原學檢測,結果見圖2。

    3  結論

    同批樣品采用普通PCR檢測偽狂犬病毒,10份樣品中有3份陽性,陽性率為30%;采用熒光PCR檢測,10份樣品全為陽性,陽性率為100%。對比發現,熒光PCR方法較普通PCR有更高的靈敏性和準確性,而且操作更為簡單快速,但是對實驗要求也較高,容易污染,造成假陽性的發生,價格也較為昂貴。普通PCR則更為準確,而且PCR擴增產物可進行回收用于下一步研究分析。兩種方法各有優缺點,在獸醫臨床中應配合使用,相得益彰。

   (陳光麗  河南省新鄉市動物疫病預防控制中心)

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