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羊梅迪-維斯納病的診斷

發(fā)布時間:2016-06-24 16:54    作者:牧通人才網(wǎng)    來源:    查看:
    1  流行病學

    該病的傳播為水平傳播,其傳播途徑為消化道和呼吸道。乳腺和肺臟是病毒排出的主要通道。實驗觀察發(fā)現(xiàn),在梅迪-維斯納病發(fā)病率高的羊圈內(nèi)出生的羔羊,于出生當時及出生后10小時、6周和1年后隔離,然后觀察8年,結果于出生當時被隔離的羔羊未觀察到感染,而其他3群分別有28%、75%和81%出現(xiàn)癥狀。在感染雙親的羊圈內(nèi)生活的時間越長,發(fā)病率越高,病情越嚴重。該病也可經(jīng)呼吸道的飛沫傳播,攝入被病毒污染的牧草也可引起感染。羊的性別和年齡對該病的易感性無直接影響。易感綿羊經(jīng)肺內(nèi)注射病羊的肺細胞和分泌物也能實驗性地傳播該病。

    2  臨床癥狀

    該病的潛伏期通常在2~3年以上。病羊首先表現(xiàn)為掉群,同時出現(xiàn)干咳并逐漸消瘦,呼吸困難日益明顯,病情進行性加重,直到死亡。維斯納病病羊最初表現(xiàn)為步樣異常、運動失調(diào)和輕癱,尤其是后肢更為明顯。有時可見頭部呈異常姿態(tài),唇或顏面肌震顫。病情緩慢增進和惡化,最后陷入對稱性麻痹而死亡。

    3  病理學診斷

    (1)病理剖檢變化。梅迪病病羊除明顯消瘦外,病變主要出現(xiàn)于肺及局部淋巴結。剖檢可見肺明顯膨大,肺的體積和重量比正常肺大2~4倍,肺和胸壁之間發(fā)生粘連,胸膜和肺質(zhì)地變硬呈棕色或暗紅色,觸之有橡皮樣感。肺小葉間質(zhì)明顯增寬。肺切面干燥,透過漿膜可見到大量粟粒狀灰色小點。縱膈淋巴結和支氣管淋巴結腫大和水腫。患維斯納病的羊,一般無眼觀變化,老齡羊的后肢骨骼肌顯著萎縮,少數(shù)病例腦膜輕度充血,或腦、脊髓切面有小的黃色斑點。關節(jié)的病變主要為滑液囊膜和黏液囊膜增生,關節(jié)囊纖維化及關節(jié)軟骨和骨變性,發(fā)病關節(jié)的關節(jié)面干燥,有纖維蛋白沉著。乳房有硬節(jié)。

    (2)病理組織學變化。主要病變是間質(zhì)性肺炎,在血管周圍、支氣管周圍或肺泡之間有淋巴樣細胞、單核細胞、巨噬細胞呈彌漫性浸潤,伴有肺泡壁肥厚和淋巴樣細胞呈結節(jié)狀集聚。維斯納病的初期病變呈彌漫性腦脊髓炎,可見淋巴樣細胞或小膠質(zhì)細胞增生、浸潤或圍管性細胞浸潤。早期在神經(jīng)組織見有星形膠質(zhì)細胞環(huán)繞血管的病灶,隨著病程發(fā)展,病灶融合成片,邊緣密度增強而中心則形成微小的空泡。病變從初期的室管膜下廣泛地蔓延到腦和脊髓實質(zhì)。繼而小腦、大腦、腦橋、延腦和脊髓等的白質(zhì)呈彌漫性脫鞘。

    4  病原學診斷

    (1)病料的采集和處理。無菌采集潛伏期和發(fā)病期病羊的脈絡叢、脾、縱膈淋巴結、唾液腺、肺、血液及腦脊髓液進行病毒分離培養(yǎng)和動物感染試驗。

    (2)分離培養(yǎng)。梅迪-維斯納病毒可以在綿羊的室管膜脈絡叢、腎、唾液腺和綿羊胎肺的原代、繼代和傳代細胞培養(yǎng)物內(nèi)增殖,其中以來源于綿羊室管膜脈絡叢細胞和綿羊胎肺細胞最常用。將無菌或除菌后的病料接種于細胞培養(yǎng)物內(nèi),在2~3周內(nèi)產(chǎn)生細胞病變,形成巨大的合胞體細胞(也稱多核巨細胞、融合細胞),每個合胞體細胞中含有2~20個細胞核,以合胞體細胞為中心,周圍是折光性強的梭形細胞。病變細胞最后崩解。經(jīng)過連續(xù)傳代后,致細胞病變的時間可縮短到培養(yǎng)的第3~15天。經(jīng)細胞培養(yǎng)傳代的病毒對羊仍有致病力。

    (3)動物回歸試驗。梅迪病采集病羊的肺制成懸液,經(jīng)鼻內(nèi)、胸腔或靜脈接種易感綿羊,1個月后撲殺檢查,感染羊的肺出現(xiàn)梅迪病的病變。維斯納病采集病羊組織制成懸液,經(jīng)腦內(nèi)接種易感綿羊,1個月內(nèi)感染羊的腦脊髓液中淋巴細胞增多,表現(xiàn)出維斯納病的神經(jīng)癥狀或病理組織學變化。用梅迪病毒感染山羊,出現(xiàn)腦炎、關節(jié)炎和間質(zhì)性進行性肺炎,并檢出抗體。

    (4)電子顯微鏡檢查。采取病羊的病變肺組織作超薄切片電鏡直接鏡檢,或?qū)⒎谓M織制成乳劑后經(jīng)差速離心處理,再以硫酸鎂或聚乙二醇濃縮,并通過柱層析提純后,用磷鎢酸負染。在電鏡下觀察病毒顆粒的形態(tài)特征。成熟的梅迪-維斯納病毒呈球形,直徑為90~100nm。病毒核心致密,直徑為30~40nm。用感染細胞培養(yǎng)物做超薄切片電鏡觀察,在感染細胞的周圍可見典型的病毒顆粒,呈球形,直徑約95nm,內(nèi)有2個或多個核芯,其絕大多數(shù)為圓形,少數(shù)為桿形或錐形。并可看到病毒粒子從感染細胞的細胞膜上釋放。

    5  血清學診斷

    已報道的血清學方法有中和試驗、補體結合試驗、被動血凝試驗、熒光抗體試驗、免疫擴散及酶聯(lián)免疫測定法等。以感染的細胞培養(yǎng)物作為抗原,用補體結合試驗和中和試驗可檢測出病羊血清中的抗體。補體結合抗體于感染后3~4周可被檢出,中和抗體在感染后第2~3個月可被檢出,均能持續(xù)數(shù)年。為了確定該病在畜群中的存在,可以應用免疫擴散試驗,但對單個動物的確診,應聯(lián)合使用上述3種方法中的至少2種。目前,廣泛應用免疫擴散試驗對羊群進行監(jiān)測。

    (孫麗麗  山東省榮成市蔭子畜牧獸醫(yī)站)

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