某規(guī)模化羊場存欄山羊520只,以圈養(yǎng)為主,曾對羊群接種過山羊痘和口蹄疫疫苗。2015年10月底羊群發(fā)病,該場獸醫(yī)對病羊進行給藥治療,效果不明顯,病情進一步蔓延。該羊場送檢病死羊2只,經(jīng)實驗室對送檢病料進行檢測,診斷為羊傳染性胸膜肺炎和鏈球菌混合感染。具體診斷情況如下。
1 臨床癥狀
病羊前期表現(xiàn)為被毛蓬松、食欲減退,后期則食欲廢絕、臥地不起、體溫偏低而死亡,而且病情傳染。通過對病死羊淋巴結(jié)、心、胰、腎、肺、胃和腸等實質(zhì)器官的觀察,只有肺稍微與胸壁粘連,無其他明顯病變。該場死亡山羊50只,死亡率為9.62%(50/520)。
2 實驗室診斷
(1)傳染性胸膜肺炎的病原核酸檢測。取送檢的2只病死羊病理變化明顯的肺臟0.5g,剪碎加入TE0.5mL,轉(zhuǎn)移到勻漿器中勻漿,將勻漿液經(jīng)反復(fù)凍融3次,8000rpm(4℃)離心5分鐘,提取上清,采用北京世紀元亨傳染性胸膜肺炎檢測試劑盒提取總DNA,針對傳染性胸膜肺炎特異性引物(目的片段 412bp)進行PCR擴增,產(chǎn)物通過 1%瓊脂糖凝膠電泳檢測。結(jié)果表明,2份羊肺臟中擴出傳染性胸膜肺炎病原目的條帶(412bp),陽性檢出率為100%(2/2)。
(2)細菌分離培養(yǎng)。無菌條件下用接種環(huán)對送檢肝臟、心臟、脾臟和腎臟等實質(zhì)器官進行細菌分離培養(yǎng),主要用鮮血瓊脂培養(yǎng)基和普通培養(yǎng)基進行培養(yǎng),37℃有氧培養(yǎng)24小時,其中在接種心臟和肝臟部位的血平板有菌落形成;細菌經(jīng)純化培養(yǎng),并進行革蘭氏染色后鏡下觀察,分離細菌為革蘭氏陽性球菌。
(3)藥物敏感實驗。將純化細菌接種于培養(yǎng)基進行藥物敏感實驗。結(jié)果見表1。
由表中數(shù)據(jù)可見,分離細菌對氟苯尼考、利福平和多西環(huán)素敏感,可用作治療和預(yù)防用藥。
3 防治建議
通過實驗室檢測,顯示羊傳染性胸膜肺炎核酸檢測為陽性,對送檢病死羊肝臟、心臟、脾臟和腎臟等實質(zhì)器官分離出致病菌進行染色、鏡檢,擬確定為鏈球菌,初步診斷病死羊可能感染了羊傳染性胸膜肺炎,繼發(fā)鏈球菌感染,對發(fā)病羊或疑似病羊進行隔離或淘汰,對病死羊尸體進行無害化處理。對羊群進行羊傳染性胸膜肺炎或羊肺炎支原體滅活疫苗接種,定期進行免疫效果監(jiān)測,確保免疫效果。嚴格控制鏈球菌繼發(fā)感染,選用敏感性高的藥物(如利福平、多西環(huán)素、氟苯尼考等)進行治療,輪換使用,配合使用維生素C等增強體質(zhì)。同時,加強飼養(yǎng)管理,提高羊只機體抵抗力,降低飼養(yǎng)密度,加強圈舍消毒,保持合理的通風(fēng)換氣。
(杜海燕 河南省新鄉(xiāng)市動物疫病預(yù)防控制中心;韓俊偉 河南省新鄉(xiāng)市動物衛(wèi)生監(jiān)督所)